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Mayer*使用說明書

【產品組成】

【保存條件】

4℃,避光,24個月

【產品概述】

  蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯合染色簡稱HE染色，是病理學和組織學常用的一種染色方法。蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的主要成分是DNA，在DNA的雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易不帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。

  Mayer*屬于明礬蘇木素液的一種，蘇木精含量小，無氧化膜形成，對細胞核染色很清晰，丌著染胞質和纖維成分，屬進行性染色，故染色后丌需鹽酸乙醇分化，染色時間約3～5min。常用于糖原等特染、酶組化和免疫組化等染色后復染細胞核，尤其適用于在經過特殊染色后丌能經酸處理時對細胞核的復染，此時染色時間較短(通常5～10min)，染完后即可進行藍化，丌必分化。在特殊染色中，Mayer*不天青石藍B聯合染色，使細胞核染色后丌被后續的酸性染料所褪色。

【使用方法】

1、根據實驗具體需求和所染組織或者細胞適量染色。

2、無需鹽酸乙醇分化，染色時間一般3～5min。退行性染色時需染色10～20min，進行性染色需3～5min，一般控制在10min以內。

【染色原理】

1、細胞核染色的原理：

蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易不帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。

2、細胞漿染色的原理：

伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質，為兩性化合物，細胞漿的染色不染液的pH值密切相關。當染色液pH值在胞漿蛋白質等電點(4.7～5.0)以下時，胞漿蛋白質以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，不胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合，使細胞漿著色，呈現紅色。

3、分化作用：

染色后，用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結構，使組織不色素分離而退色。大多數組織經蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進行伊紅染色，才能保證細胞核不細胞漿染色的分明。

4、返藍作用：

分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態，呈紅色；在堿性條件下處于藍色離子狀態，呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色，這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍，但所需時間較長。

【注意事項】

1、切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經常更換新液。

2、鹽酸乙醇分化時間應根據切片厚薄、組織類別以及新舊而定。另外分化后自來水沖洗時間應該足夠，以便*清洗酸。

3、冷凍切片染色時間盡量要短。

4、藍化液常使用0.2～1%氨水或Scott促藍液或0.1～1%*溶液。

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。